Гістотопографічна та імуногістохімічна характеристика лімфо-макрофагального інфільтрату в стромально-судинному компартменті печінки щурів за умови довгострокового експериментального впливу олії канабідіолу
DOI:
https://doi.org/10.26641/1997-9665.2025.3.149-157Ключові слова:
Канабідіол, КБД, CBD, щури, печінка, лімфо-макрофагальний інфільтрат, гістологія, імуногістохімія.Анотація
Актуальність. Канабідіол (КБД) – непсихотропний фітоканабіноїд з рослини конопель, все частіше використовується для лікування різних захворювань. Аналіз клітин імунної системи при дослідженні печінки за умови експериментального використання КБД є важливим для встановлення безпечності його використання. Мета. Визначення гістотопографічних та імуногістохімічних особливостей лімфо-макрофагального інфільтрату в стромально-судинному компартменті печінки щурів за умови довгострокового експериментального впливу 10% олії КБД. Методи. Експериментальні дослідження проведені на 40 статевозрілих білих нелінійних щурів-самців масою 180-230 г, віком 5–7 місяців на початок експерименту. Залежно від тривалості застосування олії КБД тварин дослідної групи розподілили на 2 підгрупи (серії) по 14 особин у кожній серії. Щурам першої серії впродовж 8 тижнів один раз на добу перорально крапельно вводили 10% олію КБД (доза 10 мг/кг/добу), щурам другої серії впродовж 10 тижнів також один раз на добу перорально крапельно вводили 10% олію КБД (доза 10 мг/кг/добу). До контрольної групи ввійшли 12 статевозрілих білих щурів-самців, по 6 особин у кожній серії експериментального дослідження. Наприкінці експерименту після евтаназії проводили забір печінки для морфологічного дослідження. Здійснили гістологічне, імуногістохімічне дослідження з використанням моноклональних антитіл для макрофагів і клітин Купфера CD68 (Клон KP1, Dako), Т-лімфоцитів CD3 (Клон SP7, Thermo Fisher scientific), В-лімфоцитів CD20 (Клон Ab-1, Thermo Fisher scientific), NK-лімфоцитів CD56 (Клон 123C3, Dako) відповідно до протоколу виробника з необхідними контролями. Під час порівняння показників мінімальний рівень значущості становив р< 0,05. Результати. У результаті проведеного дослідження визначені гістотопографічні та імуногістохімічні особливості лімфо-макрофагального інфільтрату в стромально-судинному компартменті печінки щурів за умови довгострокового експериментального впливу 10% олії канабідіолу (в дозі 10 мг/кг/день) впродовж 8 і 10 тижнів. У складі стромального компонента печінки встановлено наявність збільшеної кількості імунних клітин без руйнування пограничної пластинки та без поширення інфільтрату в прилеглу паренхіму печінки, без ознак дистрофії або некрозу прилеглих гепатоцитів. В обидвох серіях експерименту клітинна популяція була різноманітною, проте переважали мононуклеарні клітини лімфоїдного і макрофагального ряду. Найчисельнішою популяцією серед клітин інфільтрату були макрофаги і клітини Купфера в обидвох серіях експерименту (р<0,05). Встановлено достовірне переважання експресії загальної популяції Т-лімфоцитів в обидвох серіях в порівнянні з контролем (р<0,05) і достовірне переважання експресії Т-лімфоцитів над експресією В-лімфоцитів (р<0,05). Імуногістохімічне типування за допомогою маркера CD56 дозволило візуалізувати NK-клітини, які розташовувалися в синусоїдах на ендотеліальних клітинах або між ними. Підсумок. Комплексне дослідження лімфо-макрофагального інфільтрату в стромально-судинному компартменті печінки щурів за умови довгострокового експериментального впливу 10% олії КБД (в дозі 10 мг/кг/день) впродовж 8 і 10 тижнів вказує про безпечність застосування.
Посилання
Alamri ZZ. The role of liver in metabolism: an updated review with physiological emphasis. International Journal of Basic & Clinical Pharmacology. 2018;7(11):2271–6. doi: 10.18203/ 2319-2003.ijbcp20184211.
Daniels LJ, Kay D, Marjot T, Hodson L, Ray DW. Circadian regulation of liver metabolism: experimental approaches in human, rodent, and cellular models. Am J Physiol Cell Physiol. 2023;325(5): C1158-C1177. doi: 10.1152/ajpcell.00551.2022.
Allameh A, Niayesh-Mehr R, Aliarab A, Sebastiani G, Pantopoulos K. Oxidative Stress in Liver Pathophysiology and Disease. Antioxidants. 2023;12(9):1653. doi: 10.3390/antiox12091653.
Woltman AM, Boonstra A, Naito M, Leenen PJM. Kupffer Cells in Health and Disease. In: Biswas S.K., Mantovani A., editors. Macrophages: Biology and Role in the Pathology of Diseases. Springer; Cham, Switzerland; 2014:217–247. https:// books. google.com.ua/books?id=g_RWBQAAQBAJ&printsec=copyright&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false
Liaskou E, Wilson DV, Oo YH. Innate immune cells in liver inflammation. Mediators Inflamm. 2012;2012:949157. doi: 10.1155/2012/949157.
Guilliams M., Scott C.L. Liver macrophages in health and disease. Immunity. 2022;55:1515–29. doi: 10.1016/j.immuni.2022.08.002.
Gracia-Sancho J, Caparros E, Fernandez-Iglesias A, Frances R. Role of liver sinusoidal endothelial cells in liver diseases. Nat. Rev. Gastroenterol. Hepatol. 2021;18:411–31. doi: 10.1038/s41575-020-00411-3.
Girish V, Mousa OY, Syed K. Acute on Chronic Liver Failure. [Updated 2025 Jun 2]. In: StatPearls [Internet]. Treasure Island (FL): StatPearls Publishing; 2025. Available from: https:// www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK499902/
Malhi H, Gores GJ. Cellular and molecular mechanisms of liver injury. Gastroenterology. 2008;134(6):1641-54. doi: 10.1053/j.gastro.2008. 03.002.
Asadi-Pooya AA. Lennox-Gastaut syndro-me: a comprehensive review. Neurol Sci. 2018;39(3): 403-14. doi: 10.1007/s10072-017-3188-y.
He Z, Li Y, Zhao X, Li B. Dravet syndrome: Advances in etiology, clinical presentation, and treatment. Epilepsy Res. 2022;188:107041. doi: 10.1016/ j.eplepsyres.2022.107041.
Smith T, Majid F, Eckl V, Reynolds CM. Herbal supplement sales in US increase by record-breaking 17.3% in 2020. HerbalGram. 2021;131:52–65. https://cimasci.com/wp-content/uploads/2021/ 09/Herbal-Supplement-Sales-in-US-Increase-by-Record-Breaking-17.3-in-2020.pdf.
FDA. What You Need to Know (And What We’re Working to Find Out) About Products Containing Cannabis or Cannabis-derived Compounds, Including CBD. https://www.fda.gov/consumers/consumer-updates/what-you-need-know-and-what-were-working-find-out-about-products-containing-cannabis-or-cannabis. 2020.
Huestis MA, Solimini R, Pichini S, et al. Cannabidiol Adverse Effects and Toxicity. Curr Neuropharmacol. 2019;17:974–89. doi: 10.2174/ 1570159X17666190603171901.
Gingrich J, Choudhuri S, Cournoyer P, Downey J, Muldoon Jacobs K. Review of the oral toxicity of cannabidiol (CBD). Food Chem Toxicol. 2023;176:113799. doi: 10.1016/j.fct.2023.113799.
Madeo G, Kapoor A, Giorgetti R, Busardo FP, Carlier J. Update on Cannabidiol Clinical Toxicity and Adverse Effects: a Systematic Review. Curr Neuropharmacol. 2023. doi: 10.2174/ 1570159X21666230322143401.
Jadoon KA, Tan GD, O’Sullivan SE. A single dose of cannabidiol reduces blood pressure in healthy volunteers in a randomized crossover study. JCI Insight. 2017;2(12):e93760. doi: 10.1172/jci.insight.93760.
Kicman A, Toczek M. The effects of Cannabidiol, a non-intoxicating compound of Cannabis, on the Cardiovascular System in Health and Disease. Int J Mol Sci. 2020;21(18):6740. doi: 10.3390/ ijms21186740.
European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and Other Stientific Purposes. Strasburg: Council of Europe. 1986;123:52. Available from: https://rm.coe.int/ 168007a67b.
Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the Protection of Animals Used for Scientific Purposes. Off J Eur Union. 2010;53(L276):33–79.
Suvarna SK, Layton C, Bancroft GD. (Eds.). Bancroft's Theory and Practice of Histological Techniques, 8th Edition. Elsevier; 2019. 558 p. doi: 10.1016/B978-0-7020-6864-5.00008-6.
Magaki S, Hojat SA, Wei B, So A, Yong WH. An Introduction to the Performance of Immunohistochemistry. Methods Mol Biol. 2019;1897:289-98. doi: 10.1007/978-1-4939-8935-5_25.
Nguyen T. Immunohistochemistry: A Technical Guide to Current Practices. Cambridge: Cambridge University Press; 2022. 272 p.
Hruzieva TS, Lekhan VM, Ohniev VA, Haliienko LI, Kriachkova LV, Palamar BI, et al. [Biostatistics]. Vinnytsia: New Book; 2020. 384 p. ISBN 978-966-382-857-2 [in Ukrainian].
Silmore LH, Willmer AR, Capparelli EV, Rosania GR. Food effects on the formulation, dosing, and administration of cannabidiol (CBD) in humans: A systematic review of clinical studies. Pharmacotherapy. 2021;41(4):405-20. doi: 10.1002/ phar.2512.
Epidiolex® (cannabidiol) oral solution – access data fda.gov. https://www.accessdata.fda.gov/ drugsatfda_docs/label/2022/ 210365s015lbl.pdf.
Mujahid K, Rasheed MS, Sabir A, Nam J, Ramzan T, Ashraf W, Imran I. Cannabidiol as an immune modulator: A comprehensive review. Saudi Pharm J. 2025;33(3):11. doi: 10.1007/s44446-025-00005-7.
Braun IM, Bohlke K, Abrams DI, Anderson H, Balneaves LG, Bar-Sela G, Bowles DW, Chai PR, Damani A, Gupta A, Hallmeyer S, Subbiah IM, Twelves C, Wallace MS, Roeland EJ. Cannabis and Cannabinoids in Adults With Cancer: ASCO Guideline. J Clin Oncol. 2024;42(13):1575-93. doi: 10.1200/JCO.23.02596.
Chen JW, Borgelt LM, Blackmer AB. Cannabidiol: A New Hope for Patients With Dravet or Lennox-Gastaut Syndromes. Ann Pharmacother. 2019;53(6):603-11. doi: 10.1177/ 1060028018822124.
Brown JD, Winterstein AG. Potential Adverse Drug Events and Drug-Drug Interactions with Medical and Consumer Cannabidiol (CBD) Use. J Clin Med. 2019;8(7):989. doi: 10.3390/jcm8070989.
Corsato Alvarenga I, Wilson KM, McGrath S. Tolerability of long-term cannabidiol supplementation to healthy adult dogs. J Vet Intern Med. 2024;38(1):326-35. doi: 10.1111/jvim.16949.
##submission.downloads##
Опубліковано
Номер
Розділ
Ліцензія
Авторське право (c) 2025 Автор, журнал
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative commons Attribution 4.0 International (CC BY 4.0), яка дозволяє іншим особам вільно поширювати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи в цьому журналі.
Автори, направляючи рукопис до редакції журналу «Morphologia», погоджуються з тим, що редакції передаються права на захист і використання рукопису (переданого до редакції матеріалу, в тому числі таких об'єктів, що охороняються авторським правом, як фотографії автора, малюнки, схеми, таблиці і т.п.), в тому числі на відтворення в пресі і в мережі Інтернет; на поширення; на переклад рукопису на будь-які мови; експорту та імпорту примірників журналу зі статтею Авторів з метою поширення, доведення до загального відома. Зазначені вище права Автори передають Редакції без обмеження терміну їх дії і на території всіх країн світу без обмеження.
Автори гарантують, що вони мають виняткові права на використання матеріалів, переданих до редакції. Редактори не несуть відповідальності перед третіми особами за порушення гарантії, надані авторами. Розглянуті права передаються до редакції з моменту підписання поточної публікації для публікації. Відтворення матеріалів, опублікованих в журналі іншими особами та юридичними особами, можливе лише за згодою редакції, з обов'язковим зазначенням повної бібліографічного посилання первинної публікації. Автори залишають за собою право використовувати опублікований матеріал, його фрагменти і частини для навчальних матеріалів, усні презентації, підготовку дисертації дисертації з обов'язковою бібліографічною посиланням на оригінальну роботу. Електронна копія опублікованій статті, що завантажується з офіційного веб-сайту журналу в форматі .pdf, може бути розміщена авторами на офіційному веб-сайті їх установ, будь-яких інших офіційних ресурсах з відкритим доступом.
